Hücre kültürü için temiz bir tezgah kullanılabilir mi?

Hücre kültürü biyolojik araştırma, biyoteknoloji ve farmasötik gelişimde temel bir tekniktir. Doğal yaşam alanlarının dışındaki kontrollü bir ortamda hücrelerin büyümesini ve bakımını içerir. Başarılı hücre kültürü için kontaminasyonu önlemek ve hücre hatlarının bütünlüğünü sağlamak için temiz bir ortam çok önemlidir. Temiz bir ortam yaratmak için genellikle dikkate alınan bir ekipman, temiz tezgahtır. Temiz bir tezgah tedarikçisi olarak, hücre kültürü için temiz bir tezgah kullanılıp kullanılamayacağına sık sık sorulur. Bu blog yazısında bu soruyu ayrıntılı olarak araştıracağım.

Temiz bankları anlamak

Laminer akış dolapları olarak da bilinen temiz banklar, filtrelenmiş havayı çalışma yüzeyine yönlendirerek temiz bir çalışma ortamı sağlamak üzere tasarlanmıştır. İki ana temiz bank türü vardır: yatay ve dikey laminer akış. Yatay bir laminer akış temiz tezgahta, filtrelenmiş hava, tezgahın arkasından operatöre doğru çalışma yüzeyi boyunca yatay olarak akar. Dikey laminer akış temiz tezgahında, filtrelenmiş hava çalışma yüzeyine dikey olarak aşağı akar.

Temiz bir tezgahın birincil işlevi, çalışmayı partikül kontaminasyonundan korumaktır. Temiz tezgah içindeki hava, yüksek verimli partikül hava (HEPA) veya ultra penetrasyon hava (ULPA) filtrelerinden geçirilir; Bu, tezgah içinde bir sınıf 100 (ISO 5) veya daha iyi temiz bir ortam oluşturur, bu da 0.5 mikrometre veya daha büyük boyutta kübik küp başına 100'den fazla partikül bulunmadığı anlamına gelir.

Hücre kültürü için gereksinimler

Hücre kültürü, hücre büyümesini desteklemek ve kontaminasyonu önlemek için yüksek kontrollü bir ortam gerektirir. Temel gereksinimler şunları içerir:

Sterilite: Hücreler bakteriler, mantarlar, virüsler ve diğer mikroorganizmalar tarafından kontaminasyona karşı oldukça hassastır. Herhangi bir kontaminasyon hücrelerin ölümüne, yanlış deneysel sonuçlara ve değerli hücre hatlarının kaybına yol açabilir.
Sıcaklık ve Nem Kontrolü: Çoğu memeli hücresi 37 ° C'de kültürlenir ve yaklaşık%95'lik bir bağıl nem. Bu koşulların korunması hücre canlılığı ve büyüme için gereklidir.
Gaz bileşimi: Hücreler, tipik olarak bir oksijen ve karbondioksit karışımı olmak üzere spesifik bir gaz bileşimi gerektirir. Memeli hücreleri için, kültür ortamının pH'ını korumak için yaygın olarak% 5 co₂ atmosfer kullanılır.
Besin tedariki: Hücreler, amino asitler, vitaminler, mineraller ve büyüme faktörleri gibi temel besinleri sağlayan uygun bir kültür ortamına ihtiyaç duyar.

Hücre kültürü için temiz bir tezgah kullanmak

Temiz bir tezgah hücre kültüründe önemli bir rol oynayabilir, ancak hem avantajları hem de sınırlamaları vardır.

Avantajlar

Kontaminasyonu önleme: Hücre kültürü için temiz bir tezgah kullanmanın ana avantajı, temiz bir ortam sağlama yeteneğidir. Temiz tezgahtaki filtrelenmiş hava, havadaki parçacıkların ve mikroorganizmaların piyasaya sürülmesini en aza indirmeye yardımcı olarak, ortam değişiklikleri, hücre geçişi ve numune hazırlama gibi hücre taşıma prosedürleri sırasında kontaminasyon riskini azaltır.
Operatör koruması: Hücreleri korumanın yanı sıra, temiz bir tezgah da operatör için bir miktar koruma sağlar. Havanın laminer akışı, hücre kültürü prosedürleri sırasında üretilen aerosollerin yayılmasını önleyerek potansiyel olarak tehlikeli biyolojik malzemelere maruz kalma riskini azaltabilir.
Çok yönlülük: Temiz bankların kurulması nispeten kolaydır ve çeşitli laboratuvar ortamlarında kullanılabilir. Hem küçük ölçekli hem de büyük ölçekli hücre kültürü operasyonları için uygundur, bu da onları birçok araştırma laboratuvarı için popüler bir seçimdir.

Sınırlamalar

Sıcaklık, nem ve gaz kontrolü eksikliği: Temiz bir tezgahın ana sınırlamalarından biri, sıcaklık, nem veya gaz bileşimi üzerinde kontrol sağlamamasıdır. Temiz bir tezgahta kültürlenen hücreler, hücre büyümesi için en uygun olmayabilecek ortam laboratuvar koşullarına maruz kalacaktır. Örneğin, laboratuvar sıcaklığı çok düşük veya çok yüksekse, hücre metabolizmasını ve canlılığını etkileyebilir. Benzer şekilde, uygun nem ve gaz kontrolü olmadan, kültür ortamının pH'ı değişebilir ve hücre stresine veya ölüme yol açabilir.
Sınırlı Sterilite: Temiz bir tezgah havadaki kontaminasyon riskini azaltabilirken, diğer kaynaklardan kontaminasyon riskini tamamen ortadan kaldırmaz. Örneğin, tezgahın yüzeyleri ve tezgah içinde kullanılan ekipmanın her kullanımdan önce uygun şekilde sterilize edilmesi gerekir. Değilse, bir kontaminasyon kaynağı olarak hizmet edebilirler. Ayrıca, operatörün elleri ve giysileri mikroorganizmalar taşıyabilir ve kontaminasyonu önlemek için uygun aseptik teknikler izlenmelidir.

Tamamlayıcı ekipman

Hücre kültüründe temiz bir tezgahın sınırlamalarının üstesinden gelmek için genellikle tamamlayıcı ekipman kullanmak gerekir.

Kuluçka: Hücre kültürü için optimal sıcaklık, nem ve gaz bileşimi sağlamak için inkübatörler gereklidir. Hücreler, büyüme ve bakım sağlamak için temiz tezgahta kullanımdan sonra bir inkübatöre aktarılabilir. Hücre hatlarının spesifik gereksinimlerine göre seçilebilen co₂ inkübatörler ve hipoksik inkübatörler gibi farklı inkübatör türleri vardır.
Otoklavlar ve sterilizatörler: Autoklavlar ve sterilizörler, ekipman, ortam ve hücre kültüründe kullanılan diğer malzemeleri sterilize etmek için kullanılır. Tüm malzemelerin uygun şekilde sterilize edilmesini sağlayarak, kontaminasyon riski daha da azaltılabilir.
Çevrimiçi Toz Parçacık İzleme Sistemi: Bu sistem, temiz tezgah ve çevredeki ortam içindeki partikül konsantrasyonunu sürekli olarak izlemek için kullanılabilir. Parçacık seviyelerindeki herhangi bir artışı tespit ederek, operatörü potansiyel kontaminasyon riskleri konusunda uyarabilir ve zamanında düzeltici eylemlere izin verebilir.

Hücre kültürü için diğer temiz oda ekipmanı

Temiz banklara ek olarak, çevrenin genel temizliğini ve güvenliğini artırmak için hücre kültürü tesislerinde kullanılabilecek başka temiz oda ekipmanları da vardır.

Temiz Oda FFU: Fan filtre üniteleri (FFU'lar), temiz odalarda sabit bir filtrelenmiş hava sağlamak için kullanılır. Temiz ve tek tip bir hava ortamını korumak için bir hücre kültürü tesisinin tavanına veya duvarlarına monte edilebilirler.
Temiz oda sis duşu: Temiz odaya girmeden önce yüzey kirleticilerini personel ve ekipmandan çıkarmak için temiz oda sis duşu kullanılabilir. Bu, kirleticilerin hücre kültürü alanına sokulmasını önlemeye yardımcı olur.

Çözüm

Sonuç olarak, hücre kültürü için temiz bir tezgah kullanılabilir, ancak bağımsız bir çözüm değildir. Hücre taşıma prosedürleri sırasında havadaki kontaminasyon riskini önemli ölçüde azaltabilecek temiz bir çalışma ortamı sağlar. Bununla birlikte, sıcaklık, nem ve gaz kontrolü eksikliği nedeniyle, inkübatörler, otoklavlar ve izleme sistemleri gibi diğer ekipmanlarla birlikte kullanılması gerekir.

Hücre kültürüne katılıyorsanız ve güvenilir bir temiz tezgah veya diğer temiz oda ekipmanları arıyorsanız, yardımcı olmak için buradayız. Şirketimiz, farklı hücre kültürü uygulamalarının ihtiyaçlarını karşılamak için tasarlanmış çok çeşitli yüksek kaliteli temiz banklar ve ilgili ürünler sunmaktadır. İster küçük bir araştırma laboratuvarı ister büyük ölçekli bir biyoteknoloji şirketi olun, size doğru çözümler sunabiliriz. Gereksinimlerinizi görüşmek ve bugün bir tedarik müzakeresine başlamak için bizimle iletişime geçin.

Referanslar

Freshney, RI (2010). Hayvan hücrelerinin kültürü: Temel teknik ve özel uygulamalar kılavuzu. Wiley - Liss.
Pollard, JW ve Walker, JM (2017). Temel hücre kültürü protokolleri. Humana Basın.
ISO 14644 - 1: 2015. Temiz odalar ve ilişkili kontrollü ortamlar - Bölüm 1: Hava temizliğinin sınıflandırılması.